由新型冠状病毒引起的肺炎,截至2020 年6 月24 日,全球感染病例近千万,死亡近50 万人。 我国在较短时间内完成了该病毒的鉴定和基因组测序工作,国际病毒专家小组将此次爆发的新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2[1]。 冠状病毒为有包膜的单股正链RNA 病毒,具有跨物种传播和宿主适应性强等特点。Enserink 等在国际上首次提出2003 年的SARS 冠状病毒来自蝙蝠,后通过果子狸传播给人类[2]。 本次新型冠状病毒溯源及可能的动物中间宿主还不明确,其在除了人类以外的动物中感染情况还不清楚,目前疫情防控重点主要放在人上,而对动物的防控是盲区,动物体内如果存在病毒会对疫情的防控产生巨大威胁。 本研究对实验小鼠、大鼠、豚鼠、兔及犬中新型冠状病毒的感染情况进行了初步调查,为实验动物相关从业人员的防护提供基础数据,同时对防范新冠病毒的传播提供一定的依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料
实验动物血清均来自2020 年各实验动物生产单位送检样品[SCXK(京)2017-0005][SYXK(京)2017-0013],其中小鼠血清90 份,编号M1 ～M90;大鼠血清38 份,编号R1 ～R38;豚鼠血清20 份,编号G1～G20;兔血清27 份,编号Ra1 ～Ra27;犬血清5 份,编号C1 ～C5,详细信息见表1,已通过本院伦理审批(中检动(福)第2019(A)001 号)。
1.2 主要试剂与仪器
新型冠状病毒( SARS-CoV-2) 双抗原夹心ELISA 抗体检测试剂盒为洛阳普泰生物技术有限公司生产( 2019 兽药GMP 证字16016 号), 批号:E22A2002S。 酶 标 仪( 美 国Thermo 公 司, 型 号MK3);恒温培养箱(日本三洋公司,型号MIR-262)。
1.3 实验方法
1.3.1 ELISA 测定实验动物血清中新型冠状病毒抗体
按照ELISA 试剂盒的操作说明检测实验动物血清样品中的新型冠状病毒抗体,具体步骤如下:
a.加样:取抗原包被板,每板设阴性对照3 孔,阳性对照2 孔和空白对照1 孔,分别在相应孔中加入待测样品100 μL,阴、阳性对照每孔加入50 μL,记录样品加样顺序。
b.温育:封板膜封板,37℃温育30 min。
c.洗板:揭掉封板膜,每孔加满洗液,静置30 s,弃掉,重复洗板5 次,最后一次尽量扣干。
d.加酶:每孔加入酶标试剂100 μL,空白孔除外,37℃温育30 min。
e.洗板:同步骤c。
f.显色:每孔加入显色剂A、B 液各50 μL,轻轻振荡混匀,37℃避光显色15 min。
g.测定:每孔加入终止液50 μL,轻轻振荡混匀,设定酶标仪测定波长450 nm,用空白孔调零后测定各孔A 值。
1.3.2 结果判定
阴性对照孔A 值<0.1,阳性对照孔A 值>0.19,实验成立;临界值= 0.16+阴性对照孔A 值均值(阴性对照孔低于0.03 按0.03 计算),样品A 值≥临界值判为新冠病毒抗体阳性,样品A 值<临界值判为新冠病毒抗体阴性。
2 结果
ELISA 结果见表2,阳性对照均值为0.588,阴性对照均值为0.006,实验成立;计算临界值= 0.19,根据临界值判断90 份小鼠、38 份大鼠、20 份豚鼠、27 份兔及5 份犬血清样本中新冠病毒抗体均为阴性。
3 讨论
ELISA 检测病毒抗体是实验动物国家标准常用的病毒检测方法。 ELISA 具有灵敏度高,特异性好,操作简便等特点,对动物血清中病毒抗体检测可显示动物的既往感染情况,并可避免病毒潜伏感染造成的核酸检测假阴性结果。 近期北京新增多个病例核酸检测阴性,而抗体检测阳性,均可能由于人体免疫系统对病毒进行了一定程度的清除,此时对咽拭子样本进行核酸检测就可能出现核酸检测结果阴性。
本研究采用的ELISA 检测试剂盒来自洛阳普泰生物技术有限公司,该公司通过了兽药GMP 认证(2019 兽药GMP 证字16016 号)。 试剂盒采用双抗原夹心法检测病毒抗体,特异性良好,与小鼠肝炎病毒、大鼠冠状病毒等冠状病毒属病毒均无交叉反应。 试剂盒相关内容已制定成团体标准 “T/ CVMA 15-2020 新型冠状病毒动物血清抗体双抗原夹心酶联免疫吸附实验检测方法”,且生产单位参与了标准的制定,其检测性能可靠。 不过抗体检测也有其局限性,如抗体的产生依赖于动物的免疫状态,不适用于免疫缺陷动物的检测;同时抗体的产生需要窗口期,在窗口期检测会出现假阴性结果,因此后续的实验还需结合核酸检测进行研究。
本实验检测的样品既包含了常用品系动物,如KM、BALB / c 小鼠,SD、Wistar 大鼠等,也有各种模式动物,结果显示新冠病毒抗体均为阴性。 推测可能的原因之一是这些种类的动物机体细胞无新冠病毒受体,因而对新冠病毒不易感。 由于新冠病毒的强致病性和感染性,操作活病毒需要生物安全3级以上实验室,目前还未有实验动物人工感染新冠病毒的报道;另一原因可能在于实验动物是一类特殊群体,饲养环境、微生物状况、饲养人员、饲料和垫料等均严格控制,获得感染的几率很小,故新冠病毒抗体为阴性。
表1 实验动物样本详细信息Table 1 Information for laboratory animal samples品种Species品系Strain等级Grade年龄Age数量Number编号Serial number来源Source小鼠Mice KM SPF 6～8 周6～8 weeks 48 M1～M48 中检院NIFDC小鼠Mice BALB / c SPF 6～8 周6～8 weeks 3 M49～M51 中检院NIFDC小鼠Mice BALB / cJ SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M52～M53 中检院NIFDC小鼠Mice BALB / cAnSlac-nu SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M54～M55 中检院NIFDC小鼠Mice C57BL/ 6J SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M56～M57 中检院NIFDC小鼠Mice C57BL/ 6J-bg SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M58～M59 中检院NIFDC小鼠Mice ddY SPF 6～8 周6～8 weeks 5 M60～M64 中检院NIFDC小鼠Mice FVB / NJNju SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M65～M66 中检院NIFDC小鼠Mice NCPC / 2 SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M67～M68 中检院NIFDC小鼠Mice NPI SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M69～M70 中检院NIFDC小鼠Mice NU/ J SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M71～M72 中检院NIFDC小鼠Mice T739 SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M73～M74 中检院NIFDC小鼠Mice SCID SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M75～M76 中检院NIFDC小鼠Mice BNSG SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M77～M78 中检院NIFDC小鼠Mice TIM4 SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M79 中检院NIFDC小鼠Mice APOE SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M80 中检院NIFDC小鼠Mice LTAL SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M81 中检院NIFDC小鼠Mice EPHAL SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M82 中检院NIFDC小鼠Mice GA SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M83 中检院NIFDC小鼠Mice KPC SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M84 中检院NIFDC小鼠Mice NCoR SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M85 中检院NIFDC小鼠Mice KCG SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M86 中检院NIFDC小鼠Mice CSF1R SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M87～M88 中检院NIFDC小鼠Mice SCARB2 SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M89 中检院NIFDC小鼠Mice NCPC / 2 SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M90 中检院NIFDC大鼠Rat SD SPF 6～8 周6～8 weeks 24 R1～R24 中检院NIFDC大鼠Rat Wistar SPF 6～8 周6～8 weeks 10 R25～R34 中检院NIFDC大鼠Rat BN SPF 6～8 周6～8 weeks 1 R35 中检院NIFDC大鼠Rat F344 SPF 6～8 周6～8 weeks 2 R36～R37 中检院NIFDC大鼠Rat 三缺T,B,Nk cell combined immunodeficiency SPF 6～8 周6～8 weeks 1 R38 中检院NIFDC豚鼠Guinea pig Hartley SPF 3～4 周3～4 weeks 10 G1～G10 中检院NIFDC豚鼠Guinea pig Hartley 普通级Co
nventional 3～4 周3～4 weeks 5 G11～G15 生产单位1 Facility1豚鼠Guinea pig Hartley 普通级Co
nventional 3～4 周3～4 weeks 5 G16～G20 生产单位2 Facility2兔Rabbit 新西兰New Zealand SPF 2 月龄2 mo
nths 12 Ra1～Ra12 中检院NIFDC兔Rabbit 大耳白Big ear white SPF 2 月龄2 mo
nths 3 Ra13～Ra15 中检院NIFDC兔Rabbit 新西兰New Zealand普通级Co
nventional 2 月龄2 mo
nths 5 Ra16～Ra20 生产单位3 Facility3兔Rabbit 大耳白Big ear white普通级Co
nventional 2 月龄2 mo
nths 5 Ra21～Ra25 生产单位3 Facility3兔Rabbit 模式兔Pattern rabbit SPF 2 月龄2 mo
nths 2 Ra26～Ra27 中检院NIFDC犬Caine 比格犬Beagles普通级Conventional>12 月>12 mo
nths 5 C1～C5 生产单位4 Facility4
表2 实验动物血清中新冠病毒抗体ELISA 检测结果Table 2 ELISA test results of anti-coro
navirus antibody in serum of experimental animals样品编号Sample number A 值A value M1 0.007 M31 0.006 M61 0.004 R1 0.006 R31 0.008 Ra3 0.004 M2 0.012 M32 0.007 M62 0.004 R2 0.007 R32 0.007 Ra4 0.005 M3 0.008 M33 0.007 M63 0.006 R3 0.009 R33 0.007 Ra5 0.007 M4 0.008 M34 0.009 M64 0.031 R4 0.007 R34 0.008 Ra6 0.008 M5 0.004 M35 0.009 M65 0.007 R5 0.007 R35 0.008 Ra7 0.008 M6 0.006 M36 0.009 M66 0.009 R6 0.007 R36 0.009 Ra8 0.009 M7 0.005 M37 0.004 M67 0.008 R7 0.006 R37 0.007 Ra9 0.007 M8 0.007 M38 0.005 M68 0.008 R8 0.012 R38 0.006 Ra10 0.009 M9 0.007 M39 0.005 M69 0.004 R9 0.007 G1 0.007 Ra11 0.004 M10 0.013 M40 0.013 M70 0.004 R10 0.008 G2 0.008 Ra12 0.005 M11 0.009 M41 0.008 M71 0.006 R11 0.009 G3 0.007 Ra13 0.006 M12 0.008 M42 0.009 M72 0.016 R12 0.008 G4 0.009 Ra14 0.007 M13 0.006 M43 0.010 M73 0.008 R13 0.007 G5 0.007 Ra15 0.008 M14 0.006 M44 0.009 M74 0.009 R14 0.007 G6 0.011 Ra16 0.009 M15 0.005 M45 0.010 M75 0.008 R15 0.006 G7 0.007 Ra17 0.009 M16 0.006 M46 0.005 M76 0.009 R16 0.007 G8 0.007 Ra18 0.009 M17 0.007 M47 0.006 M77 0.005 R17 0.006 G9 0.006 Ra19 0.007 M18 0.009 M48 0.007 M78 0.056 R18 0.007 G10 0.006 Ra20 0.005 M19 0.009 M49 0.008 M79 0.006 R19 0.007 G11 0.007 Ra21 0.006 M20 0.008 M50 0.064 M80 0.006 R20 0.008 G12 0.007 Ra22 0.008 M21 0.006 M51 0.009 M81 0.008 R21 0.008 G13 0.007 Ra23 0.005 M22 0.005 M52 0.011 M82 0.009 R22 0.007 G14 0.009 Ra24 0.008 M23 0.005 M53 0.009 M83 0.008 R23 0.007 G15 0.007 Ra25 0.009 M24 0.006 M54 0.005 M84 0.008 R24 0.007 G16 0.006 Ra26 0.008 M25 0.008 M55 0.005 M85 0.005 R25 0.037 G17 0.006 Ra27 0.004 M26 0.009 M56 0.007 M86 0.005 R26 0.047 G18 0.007 C1 0.005 M27 0.008 M57 0.008 M87 0.013 R27 0.005 G19 0.008 C2 0.006 M28 0.009 M58 0.010 M88 0.006 R28 0.010 G20 0.007 C3 0.007 M29 0.005 M59 0.009 M89 0.010 R29 0.004 Ra1 0.014 C4 0.006 M30 0.005 M60 0.009 M90 0.011 R30 0.004 Ra2 0.009 C5 0.004 A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number
[ 1 ] 黄明, 雷武刚, 梅海英.新型冠状病毒肺炎患者初诊临床与CT 征象分析[ J].医学理论与实践, 2020, 33(11): 1721-1723.
[ 2 ] 陈嘉源, 施劲松, 丘栋安, 等.2019 新型冠状病毒基因组的生物信息学分析[J].生物信息学, 2020, 18(2): 96-102.
由新型冠状病毒引起的肺炎,截至2020 年6 月24 日,全球感染病例近千万,死亡近50 万人。 我国在较短时间内完成了该病毒的鉴定和基因组测序工作,国际病毒专家小组将此次爆发的新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2[1]。 冠状病毒为有包膜的单股正链RNA 病毒,具有跨物种传播和宿主适应性强等特点。Enserink 等在国际上首次提出2003 年的SARS 冠状病毒来自蝙蝠,后通过果子狸传播给人类[2]。 本次新型冠状病毒溯源及可能的动物中间宿主还不明确,其在除了人类以外的动物中感染情况还不清楚,目前疫情防控重点主要放在人上,而对动物的防控是盲区,动物体内如果存在病毒会对疫情的防控产生巨大威胁。 本研究对实验小鼠、大鼠、豚鼠、兔及犬中新型冠状病毒的感染情况进行了初步调查,为实验动物相关从业人员的防护提供基础数据,同时对防范新冠病毒的传播提供一定的依据。1 材料和方法1.1 实验材料实验动物血清均来自2020 年各实验动物生产单位送检样品[SCXK(京)2017-0005][SYXK(京)2017-0013],其中小鼠血清90 份,编号M1 ～M90;大鼠血清38 份,编号R1 ～R38;豚鼠血清20 份,编号G1～G20;兔血清27 份,编号Ra1 ～Ra27;犬血清5 份,编号C1 ～C5,详细信息见表1,已通过本院伦理审批(中检动(福)第2019(A)001 号)。1.2 主要试剂与仪器新型冠状病毒( SARS-CoV-2) 双抗原夹心ELISA 抗体检测试剂盒为洛阳普泰生物技术有限公司生产( 2019 兽药GMP 证字16016 号), 批号:E22A2002S。 酶 标 仪( 美 国Thermo 公 司, 型 号MK3);恒温培养箱(日本三洋公司,型号MIR-262)。1.3 实验方法1.3.1 ELISA 测定实验动物血清中新型冠状病毒抗体按照ELISA 试剂盒的操作说明检测实验动物血清样品中的新型冠状病毒抗体,具体步骤如下:a.加样:取抗原包被板,每板设阴性对照3 孔,阳性对照2 孔和空白对照1 孔,分别在相应孔中加入待测样品100 μL,阴、阳性对照每孔加入50 μL,记录样品加样顺序。b.温育:封板膜封板,37℃温育30 min。c.洗板:揭掉封板膜,每孔加满洗液,静置30 s,弃掉,重复洗板5 次,最后一次尽量扣干。d.加酶:每孔加入酶标试剂100 μL,空白孔除外,37℃温育30 min。e.洗板:同步骤c。f.显色:每孔加入显色剂A、B 液各50 μL,轻轻振荡混匀,37℃避光显色15 min。g.测定:每孔加入终止液50 μL,轻轻振荡混匀,设定酶标仪测定波长450 nm,用空白孔调零后测定各孔A 值。1.3.2 结果判定阴性对照孔A 值<0.1,阳性对照孔A 值>0.19,实验成立;临界值= 0.16+阴性对照孔A 值均值(阴性对照孔低于0.03 按0.03 计算),样品A 值≥临界值判为新冠病毒抗体阳性,样品A 值<临界值判为新冠病毒抗体阴性。2 结果ELISA 结果见表2,阳性对照均值为0.588,阴性对照均值为0.006,实验成立;计算临界值= 0.19,根据临界值判断90 份小鼠、38 份大鼠、20 份豚鼠、27 份兔及5 份犬血清样本中新冠病毒抗体均为阴性。3 讨论ELISA 检测病毒抗体是实验动物国家标准常用的病毒检测方法。 ELISA 具有灵敏度高,特异性好,操作简便等特点,对动物血清中病毒抗体检测可显示动物的既往感染情况,并可避免病毒潜伏感染造成的核酸检测假阴性结果。 近期北京新增多个病例核酸检测阴性,而抗体检测阳性,均可能由于人体免疫系统对病毒进行了一定程度的清除,此时对咽拭子样本进行核酸检测就可能出现核酸检测结果阴性。本研究采用的ELISA 检测试剂盒来自洛阳普泰生物技术有限公司,该公司通过了兽药GMP 认证(2019 兽药GMP 证字16016 号)。 试剂盒采用双抗原夹心法检测病毒抗体,特异性良好,与小鼠肝炎病毒、大鼠冠状病毒等冠状病毒属病毒均无交叉反应。 试剂盒相关内容已制定成团体标准 “T/ CVMA 15-2020 新型冠状病毒动物血清抗体双抗原夹心酶联免疫吸附实验检测方法”,且生产单位参与了标准的制定,其检测性能可靠。 不过抗体检测也有其局限性,如抗体的产生依赖于动物的免疫状态,不适用于免疫缺陷动物的检测;同时抗体的产生需要窗口期,在窗口期检测会出现假阴性结果,因此后续的实验还需结合核酸检测进行研究。本实验检测的样品既包含了常用品系动物,如KM、BALB / c 小鼠,SD、Wistar 大鼠等,也有各种模式动物,结果显示新冠病毒抗体均为阴性。 推测可能的原因之一是这些种类的动物机体细胞无新冠病毒受体,因而对新冠病毒不易感。 由于新冠病毒的强致病性和感染性,操作活病毒需要生物安全3级以上实验室,目前还未有实验动物人工感染新冠病毒的报道;另一原因可能在于实验动物是一类特殊群体,饲养环境、微生物状况、饲养人员、饲料和垫料等均严格控制,获得感染的几率很小,故新冠病毒抗体为阴性。表1 实验动物样本详细信息Table 1 Information for laboratory animal samples品种Species品系Strain等级Grade年龄Age数量Number编号Serial number来源Source小鼠Mice KM SPF 6～8 周6～8 weeks 48 M1～M48 中检院NIFDC小鼠Mice BALB / c SPF 6～8 周6～8 weeks 3 M49～M51 中检院NIFDC小鼠Mice BALB / cJ SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M52～M53 中检院NIFDC小鼠Mice BALB / cAnSlac-nu SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M54～M55 中检院NIFDC小鼠Mice C57BL/ 6J SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M56～M57 中检院NIFDC小鼠Mice C57BL/ 6J-bg SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M58～M59 中检院NIFDC小鼠Mice ddY SPF 6～8 周6～8 weeks 5 M60～M64 中检院NIFDC小鼠Mice FVB / NJNju SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M65～M66 中检院NIFDC小鼠Mice NCPC / 2 SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M67～M68 中检院NIFDC小鼠Mice NPI SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M69～M70 中检院NIFDC小鼠Mice NU/ J SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M71～M72 中检院NIFDC小鼠Mice T739 SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M73～M74 中检院NIFDC小鼠Mice SCID SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M75～M76 中检院NIFDC小鼠Mice BNSG SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M77～M78 中检院NIFDC小鼠Mice TIM4 SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M79 中检院NIFDC小鼠Mice APOE SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M80 中检院NIFDC小鼠Mice LTAL SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M81 中检院NIFDC小鼠Mice EPHAL SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M82 中检院NIFDC小鼠Mice GA SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M83 中检院NIFDC小鼠Mice KPC SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M84 中检院NIFDC小鼠Mice NCoR SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M85 中检院NIFDC小鼠Mice KCG SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M86 中检院NIFDC小鼠Mice CSF1R SPF 6～8 周6～8 weeks 2 M87～M88 中检院NIFDC小鼠Mice SCARB2 SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M89 中检院NIFDC小鼠Mice NCPC / 2 SPF 6～8 周6～8 weeks 1 M90 中检院NIFDC大鼠Rat SD SPF 6～8 周6～8 weeks 24 R1～R24 中检院NIFDC大鼠Rat Wistar SPF 6～8 周6～8 weeks 10 R25～R34 中检院NIFDC大鼠Rat BN SPF 6～8 周6～8 weeks 1 R35 中检院NIFDC大鼠Rat F344 SPF 6～8 周6～8 weeks 2 R36～R37 中检院NIFDC大鼠Rat 三缺T,B,Nk cell combined immunodeficiency SPF 6～8 周6～8 weeks 1 R38 中检院NIFDC豚鼠Guinea pig Hartley SPF 3～4 周3～4 weeks 10 G1～G10 中检院NIFDC豚鼠Guinea pig Hartley 普通级Co
nventional 3～4 周3～4 weeks 5 G11～G15 生产单位1 Facility1豚鼠Guinea pig Hartley 普通级Co
nventional 3～4 周3～4 weeks 5 G16～G20 生产单位2 Facility2兔Rabbit 新西兰New Zealand SPF 2 月龄2 mo
nths 12 Ra1～Ra12 中检院NIFDC兔Rabbit 大耳白Big ear white SPF 2 月龄2 mo
nths 3 Ra13～Ra15 中检院NIFDC兔Rabbit 新西兰New Zealand普通级Co
nventional 2 月龄2 mo
nths 5 Ra16～Ra20 生产单位3 Facility3兔Rabbit 大耳白Big ear white普通级Co
nventional 2 月龄2 mo
nths 5 Ra21～Ra25 生产单位3 Facility3兔Rabbit 模式兔Pattern rabbit SPF 2 月龄2 mo
nths 2 Ra26～Ra27 中检院NIFDC犬Caine 比格犬Beagles普通级Conventional>12 月>12 mo
nths 5 C1～C5 生产单位4 Facility4表2 实验动物血清中新冠病毒抗体ELISA 检测结果Table 2 ELISA test results of anti-coro
navirus antibody in serum of experimental animals样品编号Sample number A 值A value M1 0.007 M31 0.006 M61 0.004 R1 0.006 R31 0.008 Ra3 0.004 M2 0.012 M32 0.007 M62 0.004 R2 0.007 R32 0.007 Ra4 0.005 M3 0.008 M33 0.007 M63 0.006 R3 0.009 R33 0.007 Ra5 0.007 M4 0.008 M34 0.009 M64 0.031 R4 0.007 R34 0.008 Ra6 0.008 M5 0.004 M35 0.009 M65 0.007 R5 0.007 R35 0.008 Ra7 0.008 M6 0.006 M36 0.009 M66 0.009 R6 0.007 R36 0.009 Ra8 0.009 M7 0.005 M37 0.004 M67 0.008 R7 0.006 R37 0.007 Ra9 0.007 M8 0.007 M38 0.005 M68 0.008 R8 0.012 R38 0.006 Ra10 0.009 M9 0.007 M39 0.005 M69 0.004 R9 0.007 G1 0.007 Ra11 0.004 M10 0.013 M40 0.013 M70 0.004 R10 0.008 G2 0.008 Ra12 0.005 M11 0.009 M41 0.008 M71 0.006 R11 0.009 G3 0.007 Ra13 0.006 M12 0.008 M42 0.009 M72 0.016 R12 0.008 G4 0.009 Ra14 0.007 M13 0.006 M43 0.010 M73 0.008 R13 0.007 G5 0.007 Ra15 0.008 M14 0.006 M44 0.009 M74 0.009 R14 0.007 G6 0.011 Ra16 0.009 M15 0.005 M45 0.010 M75 0.008 R15 0.006 G7 0.007 Ra17 0.009 M16 0.006 M46 0.005 M76 0.009 R16 0.007 G8 0.007 Ra18 0.009 M17 0.007 M47 0.006 M77 0.005 R17 0.006 G9 0.006 Ra19 0.007 M18 0.009 M48 0.007 M78 0.056 R18 0.007 G10 0.006 Ra20 0.005 M19 0.009 M49 0.008 M79 0.006 R19 0.007 G11 0.007 Ra21 0.006 M20 0.008 M50 0.064 M80 0.006 R20 0.008 G12 0.007 Ra22 0.008 M21 0.006 M51 0.009 M81 0.008 R21 0.008 G13 0.007 Ra23 0.005 M22 0.005 M52 0.011 M82 0.009 R22 0.007 G14 0.009 Ra24 0.008 M23 0.005 M53 0.009 M83 0.008 R23 0.007 G15 0.007 Ra25 0.009 M24 0.006 M54 0.005 M84 0.008 R24 0.007 G16 0.006 Ra26 0.008 M25 0.008 M55 0.005 M85 0.005 R25 0.037 G17 0.006 Ra27 0.004 M26 0.009 M56 0.007 M86 0.005 R26 0.047 G18 0.007 C1 0.005 M27 0.008 M57 0.008 M87 0.013 R27 0.005 G19 0.008 C2 0.006 M28 0.009 M58 0.010 M88 0.006 R28 0.010 G20 0.007 C3 0.007 M29 0.005 M59 0.009 M89 0.010 R29 0.004 Ra1 0.014 C4 0.006 M30 0.005 M60 0.009 M90 0.011 R30 0.004 Ra2 0.009 C5 0.004 A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number A 值A value样品编号Sample number参考文献:[ 1 ] 黄明, 雷武刚, 梅海英.新型冠状病毒肺炎患者初诊临床与CT 征象分析[ J].医学理论与实践, 2020, 33(11): 1721-1723.[ 2 ] 陈嘉源, 施劲松, 丘栋安, 等.2019 新型冠状病毒基因组的生物信息学分析[J].生物信息学, 2020, 18(2): 96-102.
文章来源：实验动物科学 网址: http://sydwkx.400nongye.com/lunwen/itemid-29427.shtml
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